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FTA采血卡樣本診斷血源最佳實(shí)踐
FTA采血卡背景:血源性傳染病的診斷主要依賴于檢測(cè)血液樣本中的致病因子。分子技術(shù)為此提供了敏感和特定的工具,雖然在現(xiàn)場(chǎng)環(huán)境中使用這些方法存在相當(dāng)大的困難,但是在大規(guī)模流行病學(xué)研究中,FTA采血卡仍越來(lái)越受歡迎,它可以快速收集和存檔大量樣品。雖然這些卡的下游處理存在一些困難,但對(duì)于準(zhǔn)確診斷感染是必不可少的。在這里,我們描述了使用PCR從FTA采血卡進(jìn)行樣本處理的最佳實(shí)踐方法的建議,用于錐蟲(chóng)病的分子診斷。
結(jié)果,對(duì)五種技術(shù)進(jìn)行了比較。直接施用全血的檢測(cè)靈敏度(35.6%)低于全血,隨后使用Chelex?100(56.4%)從卡上洗脫。當(dāng)在FTA卡上施用血液之前裂解時(shí),獲得了更好的表觀敏感性(73.3%),盡管這并不重要。使用Chelex?100(73.3%)進(jìn)行后續(xù)洗脫后,這種情況沒(méi)有改善,與野外血液直接DNA提取無(wú)顯著差異(68.3%)。
結(jié)論:基于這些結(jié)果,這些技術(shù)所需的努力程度以及現(xiàn)場(chǎng)條件下DNA提取的難度,我們采血卡廠家建議:將血液轉(zhuǎn)移到FTA采血卡上,然后在Chelex?100中作為最佳方法進(jìn)行洗脫。