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采血卡的DNA回收
從省出生缺陷監(jiān)測(cè)項(xiàng)目獲得的24份新生兒干血樣中提取純化的DNA。通過(guò)該技術(shù),從兩個(gè)完全相同的3 mm處平均回收率為260 ng+/-70 ng。基于(9)表中的數(shù)據(jù)表11結(jié)果表明,從配對(duì)3 mm(260 Ng)獲得的DNA回收率約為先前研究方法(60 Ng)的4倍。假設(shè)每毫米干血0.6微升2 [14平均產(chǎn)量每?jī)煞N直徑3毫米,分布在14毫米以上。,平均DNA回收率為19納克/毫米2,平均每組24份樣本,平均DNA回收率為30 ng/ul,接近預(yù)期的100%DNA回收率。
DNA濃度測(cè)定采用銀染分析法。紅色樣品是指用于分析的樣品,根據(jù)其DNA濃度超過(guò)50 ng/ul的要求,以適應(yīng)雜交化學(xué)。請(qǐng)注意,8個(gè)用于分析的樣本的平均DNA產(chǎn)量(In)和它們的平均年齡與所有24個(gè)樣本的平均DNA產(chǎn)量沒(méi)有顯著性差異。然而,由于最終濃縮DNA樣品的體積變異性,用于分析的8個(gè)樣品(59 ng/ul)的質(zhì)量濃度大約是整個(gè)樣品(26 ng/ul)的平均濃度的兩倍。
DNA質(zhì)量
用0.8%變性凝膠電泳測(cè)定DNA長(zhǎng)度。,將所選擇的每個(gè)樣品的100 ng進(jìn)行分析(RANE2-9)與100 ng的超高相對(duì)分子質(zhì)量DNA對(duì)照(RAN 11)進(jìn)行比較。在所有情況下,相對(duì)于外部尺寸標(biāo)準(zhǔn)(通道1和10),采血卡DNA樣本都呈現(xiàn)為一個(gè)折疊帶,在40 kb范圍內(nèi)。對(duì)其余15個(gè)樣本進(jìn)行了類似的分析,但未用于分析綜合這些數(shù)據(jù)表明,從這些采血卡中分離出的大部分DNA都大于40 kb。